使用XX-15C紫外線燈來進行菌種誘變育種

美國路陽公司生產的XX-15C臺式紫外線燈，安裝有2根15w 254nm，鏡面鋁合金反光板，隔板可調臺式支架，是實驗室紫外照射的便捷工具。

波長254nm的紫外線，正好是食用菌遺傳變異物質一核酸的吸收髙峰，菌種細胞即使受到紫外線的輕度照射，也會使遺傳物質一一脫氧核糖核酸（DNA）發生巨大的變化。 常見的變化有：DNA鍵的斷麵,氫鍵飭斷裂，嘧啶的水合化， 胸腺嘧啶二聚體的形成，八分乇內和分子間的交聯等。 所以，紫外線是誘導食用菌,其它搟生物菌種發生變異的誘變劑，在誘變的基礎上，就可能選育出優良的菌種來。

用XX-15C臺式紫外線燈進行紫外線誘變育種，首先應準備孢子懸浮液。將新鮮食用菌無菌孢子移入5毫升無菌生理食鹽水（經滅菌處理 的0.9%溶液），或磷酸緩沖溶液（由15克磷酸氫二鈉和2克磷酸二氫鉀共溶于1000亳升經滅菌而得的蒸餾水）中，搖勻后即成孢子懸浮液，萁濃度以每毫升含孢子100萬至1億 個為宜。

誘變時，在暗室內開啟XX-15C臺式紫外線燈，調整紫外線燈臺式支架的隔板高度。開始先開燈20分鐘，波長穩定后取5亳升孢子懸浮液 倒入直徑6厘米的無菌培養皿中，揭開皿蓋，搖動培養皿， 使照射均勻，照射時間0.5—1.0分鐘，照射后的抱子懸浮液每毫升含活孢子數在10—1000萬個之間。要得到單菌落，得 先用無菌水樣釋至每亳升10—100個，再取稀釋液0.2毫升， 涂布于裝有瓊脂的培養皿上，在25℃溫度下培育5—10天， 待菌落出現后，選純正、健壯的單菌落移入斜面試管培養， 并做拮抗試驗。

拮抗試驗是取處理和未處理的菌絲各一塊，接在同一斜面上，相距1 一2厘米，如處理后的孢子已發生變異，其菌絲與未處理的菌絲在相接處就會發生拮抗，形成一條明顯的拮抗線；若未發生變異，則兩方面的菌絲相連接成一體。

XX-15C臺式紫外線燈支架有多個檔位可以調節，方便老師做不同距離、不同強度的紫外線誘變照射實驗

美國路陽 XX-15A/XX-20A/XX-40AA實驗室用紫外線燈

文章轉自：http://www.luyor.cn/news/case/560.html 

紫外交聯儀UCL-3500用做紫外誘變箱，紫外誘變儀

紫外誘變育種的原理是什么？

誘變育種決定生物遺傳物質DNA的吸收光譜（200-300nm）處于紫外線光譜中。當生物的DNA吸收紫外線后，分子機構發生很大變化，這種變化可能會導致DNA遺傳性大幅度的改變，并在多數情況下因為這種改變導致細胞無法正常繁殖和代謝而在短期內死亡，但少量存活細胞中包含的基因突變并具有一定的存活能力，提取這些細胞經過一段的培養，可以選擇出有益的變異株加以擴大培養，從而得到希望的品種。

用哪個波段紫外線進行紫外誘變育種？

紫外交聯儀UCL-3500內置了6根254nm紫外線燈管，紫外輻照均勻，可以根據自己需要設定輻照時間，也可以根據能量設置輻照能量值。

紫外誘變育種能量是多少？

因不同細胞的吸收能量不同，照射能量由實際育種要求而定，通常，需要控制發生突變的且能存活下來的比例在10-50%即可。

微生物育種的目的就是要人為地使某些代謝產物過量積累,把生物合成的代謝途徑朝人們所希望的方向加以引導,或者促使細胞內發生基因的重新組合優化遺傳性狀,獲得所需要的高產、優質和低耗的菌種。誘變和篩選則是微生物育種的兩個主要環節。

 育種可分為自發性突變育種和誘發突變育種。但是自發突變的頻率很低，一般在 10 -6 ~10 -10 ，而誘變育種頻率較高。誘變育種就是利用物理和化學誘變劑處理均勻分散的微生物細胞群，大幅度提高突變頻率，然后設法采用簡便、快速和高效的篩選方法，從中挑選少數符合育種目的的突變株。誘變育種除能提高產量外，還可達到改進產品質量、擴大品種和簡化生產工藝等目的，是目前廣泛使用的育種手段。

 誘變育種主要通過物理誘變劑（如：紫外線、X-射線、γ-射線、快中子、激光、超聲波等）和化學誘變劑（如亞硝酸、硫酸二乙酯、亞硝基胍、吖啶類染料等）處理微生物群體細胞，通過合理的篩選程序和方法，從中選出遺傳物質分子結構發生改變的少數細胞。常利用形態突變型、生化突變型、條件致死突變型和致死突變型進行初篩而獲得優良性狀的突變株。誘變育種方法簡便，容易掌握，仍是目前行之有效的一種重要育種手段，但自覺性、方向性差。

物理誘變因子中以紫外線輻射的使用為普遍，其他物理誘變因子則受設備條件的限制，難以普及。一般用于誘變育種的物理因子有快中子、60Co、γ-射線和高能電子流β-射線等。紫外線作為物理誘變因子用于工業微生物菌種的誘變處理具有悠久的歷史，盡管幾十年來各種新的誘變劑不斷出現和被應用于誘變育種，但到目前為止，對于經誘變處理后得到的高單位抗生素產生菌種中，有80%左右是通過紫外線誘變后經篩選而獲得的。因此，對于微生物菌種選育工作者來說，紫外線作為誘變因子還是應該首先考慮的。

紫外線可以引起的 DNA 損傷，可使同鏈 DNA 的相鄰嘧啶間形成共價結合的胸腺嘧啶二聚體，二聚體的出現會減弱雙鏈間氫鍵的作用，并引起雙鏈結構發生扭曲變形，阻礙堿基間的正常配對，從而可能引起突變或死亡。

在傳統的物理誘手段中，紫外線誘變由于有設備簡單，誘變效率高,操作安全簡便等特點而被廣泛應用。經大量實驗證明利用紫外誘變的方法能選育出大量產量高，活性強的優良微生物菌種。本實驗將利用紫外誘變法，篩選出利福平抗性更高的菌株。